MSLASpheroidStamp:让每个人都能使用3D细胞球体
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关键词
摘要
3D细胞培养,如细胞球体,广泛应用于生物学中,用于模拟生物过程、研究细胞间相互作用和药物化合物筛选,正成为细胞培养实验室中不可或缺的对象。生产细胞球体的方法有很多,成本和便利性各不相同。其中一种最方便且经济的方法是使用琼脂糖微孔板。我们开发了在标准培养塑料中利用业余级MSLA 3D打印机制造琼脂糖微孔板的方法。使用3D打印可以在各种形状和尺寸范围内定制微孔板,并将生产过程从少量细胞球体扩展到数万个。我们已经证明,可以在带有玻璃底的培养皿中创建凝胶微孔板,这使我们能够轻松实现细胞球体的时间推移共聚焦显微镜观察,并且我们还在同一培养皿中进行了原位光学透明化以研究细胞球体结构。我们展示了在常用的96孔板中研究各种物质和纳米颗粒的细胞毒性的能力。最后,在本文中我们描述了我们方法的困难和局限性,并提出了解决方案,使读者不仅能够复制它,还能根据特定实验室的需求进行调整,使用提供的3D模型和说明。
AI理解论文
该文档主要探讨了MSLA(掩模立体光刻)3D打印技术的特点、能力和局限性,并详细描述了用于研究和分析3D打印对象的实验流程。以下是对文档的深入总结:
1. MSLA 3D打印技术概述
MSLA打印机基于立体光刻技术,通过光聚合光敏化合物来生成三维模型。其核心组件包括一个装有液态光聚合物的槽(底部为透明的FEP膜),一个LCD屏幕,以及安装在屏幕下方的LED阵列。打印过程中,平台自动下降至树脂槽中,光通过LCD屏幕投射到平台上,屏幕的像素控制光的通过,形成打印过程中的“掩模”。
2. 实验流程与方法
文档详细描述了用于研究MSLA打印对象的实验流程,涉及多个软件和工具的使用:
- CAD模型创建与转换:首先从CAD导出.stl文件,然后使用Python的stl-to-voxel库将其转换为分层的.tiff图像集。
- 切片与转换:使用切片软件将stl模型转换为.pwmo文件,再通过UVTools将其转换为.tiff图像集。
- 显微镜成像:使用共聚焦显微镜(CLSM)收集图像,并在ImageJ中手动对齐,最后在napari中生成3D图像和动画。
- Blender可视化:使用Blender和tif2blender插件导入显微镜数据和3D模型,并通过发射体积着色器进行可视化。
3. MSLA 3D打印的能力与局限性
文档深入探讨了MSLA打印的能力和局限性,特别是在打印具有小表面特征的对象时需要考虑的因素:
- 打印角度:为了减少对象与FEP膜的接触面积,通常将对象以一定角度放置,并添加支撑以确保成功打印。
- 分辨率限制:在xy轴上,分辨率受限于LCD屏幕的像素大小(约40x40μm),而在z轴上,分辨率受限于层高(25-50μm)。这种限制导致打印对象与数字模型之间存在几何失真。
- 粘附与脱落问题:FEP膜对光聚合物的粘附性虽小但不为零,随着时间推移,膜会退化,导致打印对象更容易脱落。
4. 实验结果与讨论
文档通过实验验证了MSLA打印的局限性,特别是在打印复杂几何形状时的失真问题:
- 几何失真:打印的对象通常与CAD设计的模型存在显著差异,例如圆锥体变成了复杂形状的金字塔,平滑的金字塔面变得阶梯状。
- 微观结构的挑战:小尺寸的对象(如直径100μm的圆柱体)由于脆弱性和树脂的高粘度而无法成功打印。
- 多对象打印的可靠性:当同时打印大量小对象时,许多对象会在打印过程中损坏或断裂。
5. 结论
文档总结了MSLA 3D打印技术的应用潜力和局限性,强调了在打印复杂和小型结构时需要克服的挑战。通过结合多种软件工具和显微镜技术,研究人员能够更好地分析和理解打印对象的几何失真和结构特征。
总之,该文档为MSLA 3D打印技术的研究提供了详细的实验流程和分析方法,揭示了其在实际应用中的挑战和改进空间。
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